任务一 学会使用分光光度计
任 务 简 介
分光光度计是目前化验室中使用比较广泛的一种分析仪器，其测定原理是利用物质对光的选择性吸收特性，以纯的单色光作为入射光，测定物质对光的吸收，从而确定溶液中物质的含量。其特点是灵敏度高、准确度高、操作简便、分析速度快、应用广泛。
任 务 目 标
（1）会调节分光光度计的波长。
（2）会操作吸光度和透光率的相互转化。
（3）能掌握比色皿的使用方法。
（4）会测皿差。
任 务 准 备
试剂与仪器
1．试剂
蒸馏水
2．仪器
SP-723可见分光光度计、成套比色皿。
内 容
1．SP-723可见分光光度计的使用
SP-723可见分光光度计如图1-1所示。
图1-1 SP-723可见分光光度计
（1）接通电源，打开仪器电源开关（图1-2），预热20min（图1-3）。
（2）按“MODE”模式键，进入吸光度A模式，见图1-4（A模式、T模式、C模式循环）。
（3）按“▲”“
”设置键，将波长调到实验所需的单色光波长（见图1-5、图1-6）。调节分光光度计的波长可发现可见光的不同颜色（见图1-7、图1-8）。
（4）调节仪器T=100%（A=0.000）。把挡板推入光路，按“0% T”键（见图1-9），再把参比溶液（蒸馏水）推入光路，按“100% T”键（见图1-10），使T=100%（A=0.000）。
图1-3 预热20min
图1-4 按“MODE”模式键，进入吸光度A模式
图1-5 向上调节波长
图1-6 向下调节波长
图1-7 波长500nm，绿色光
图1-8 波长600nm，橙色光
图1-9 按“0% T”键
图1-10 按“100% T”键
（5）把显色液拉入光路（见图1-11，拉二挡），读出吸光度A，并记录（见图1-12）。
图1-11 显色液拉入光路
图1-12 读吸光度A，记录
（6）实验结束，取出比色皿，切断电源。
2．比色皿的使用
（1）知晓不同规格的比色皿（见图1-13），如0.5cm、1cm、3cm的比色皿。
图1-13 不同规格的比色皿
（2）比色皿要保持干燥清洁，不能长时间盛装有色溶液，用后要立即清洗，可定期用盐酸+乙醇（1+2）洗涤液洗涤，蒸馏水洗净，切忌用碱或强氧化剂洗涤，也不能用毛刷刷洗。洗净后自然风干或冷风吹干，不能放干燥箱内烘干。
（3）拿取比色皿磨砂面（见图1-14），手指不能接触透光面。放入液槽架前，用细软而吸水的纸轻轻吸干外部液滴，再用擦镜纸擦拭（见图1-15），避免透光面擦出斑痕。
图1-14 拿磨砂面
图1-15 用擦镜纸沿同一方向擦
（4）注入被测溶液前，比色皿要用被测溶液淋洗几次（见图1-16），以免影响溶液浓度。溶液应充至比色皿全高度的2/3～4/5（见图1-17），不宜太满。
图1-16 蒸馏水润洗
图1-17 装液量为2/3～4/5
（5）比色皿光面应对准光路（见图1-18）。同组比色皿间透光率误差要求小于0.5%。通常四个同规格比色皿都盛放蒸馏水参比溶液，按“MODE” 模式键，进入透光率T模式，按“100% T”键，使T=100%，再测量其他比色皿的透光率，误差小于0.5%者可配套使用。
（6）已配对的比色皿测皿差：按“MODE”模式键，进入吸光度A模式，按“100% T”键，使T=100%，A=0.000，再测出其他比色皿的吸光度，即皿差（见图1-19）。
图1-18 比色皿光面对准光路
图1-19 测定同组比色皿的皿差
知识链接
紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度计的主要部件包括光源、单色器、吸收池、检测器及测量显示系统等。
1．光源
（1）钨灯 可见分光光度计光源，能发射320nm～3.5μm的连续光谱。
（2）氢灯或氘灯 紫外分光光度计的紫外光源。能发射150～400nm的光谱。
2．单色器
单色器是将复杂的白光按照波长的长短顺序分散为单色光的装置。
3．吸收池
用来盛放溶液的容器称为吸收池，也叫比色皿。可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英吸收池。同组实验使用的吸收池要求透光率相同，其透光率误差应在0.2%～0.5%以内。
4．检测器
分光光度计的光电转换元件。有硒光电池、光电管、光电倍增管。
5．测量显示系统
能显示测量的实验数据，如透光率T、吸光度A等。
任 务 总 结
技能点 知识点
SP-723分光光度计的使用
紫外-可见分光光度计的主要部件
比色皿的使用
思 考 题
（1）紫外-可见分光光度计由哪几个部分组成？
（2）紫外-可见分光光度计中的成套吸收池其透光率之差应为多少？
（3）最常见的可见光光源是什么？紫外光光源是什么？
（4）比色皿在使用时应注意哪些问题？
（5）上网查询500nm和600nm的光谱分别是什么颜色？