实验三　补体结合试验

补体是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质，它是由30余种可溶性蛋白、膜结合蛋白和补体受体组成的多分子系统，故称为补体系统。本次试验为补体结合试验，是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素（绵羊红细胞抗体）作为指示系统的血清学反应。本实验敏感性高、特异性强，在临床上可用于某些病毒感染、立克次体病及梅毒的辅助诊断。

实验目的

1.熟悉　补体结合试验的原理。

2.了解　补体结合试验的方法及应用。

基本原理

补体结合试验由两个系统与补体，共五种成分构成。两个系统指待检系统和指示系统，其中待检系统包括已知抗体或抗原，被检抗原或抗体；指示系统包括绵羊红细胞和溶血素。先使待检系统的抗原和抗体反应再加入补体，最后加入指示系统成分，作用一定时间后，观察结果。根据补体是否被结合来说明待检系统中的抗原与抗体是否特异性结合，而补体是否被结合则可通过指示系统是否溶血来证明。实验结果若不出现溶血，判为阳性，表示待检系统中的抗体和抗原特异性结合，两者结合后固定了补体，指示系统无补体结合，所以不发生溶血。反之则出现溶血现象，结果为阴性。

实验材料

（1）指示系统：溶血素（2U/0.25ml）、1%绵羊红细胞。

（2）待检系统：抗体（1∶50抗鸡卵白蛋白）、抗原（2U/0.25ml鸡卵白蛋白）。

（3）补体：2U/0.5ml。

（4）7支试管、吸管、生理盐水、水浴箱等。

实验方法

（1）取7支试管，依次编号。

（2）按表1-3-1进行操作。

实验结果

观察各试管溶血情况，根据溶血程度判定结果。第4、5、6试管均溶血，第7试管不溶血。第1、2、3试管为试验管，结果出现不溶血者为阳性。判断阳性的强弱，以100%不溶血为极强阳性；80%不溶血为强阳性，50%不溶血为阳性。若结果出现完全溶血者则为阴性。

注意事项

（1）注意反应条件，如反应温度、时间等。

（2）操作过程中严格执行无菌操作。

临床意义

补体结合试验在临床上常用于病原菌的检测，如用于检查梅毒的梅毒补体结合反应（瓦氏反应，Wassermann reaction），这是最常进行的补体结合试验。