第二节　免疫技术应用研究及发展趋势

免疫学技术现就免疫荧光技术、免疫层析技术、酶联免疫吸附测定、电化学免疫传感器、免疫磁珠分离技术及分子印迹技术等的应用研究发展趋势分别论述如下。

1.免疫荧光技术

免疫荧光技术就是指用荧光色素对目标物标记后，再对其进行定性定量检测的一种实验技术。其基本原理就是抗体和抗原发生特异性结合后，使用荧光显微镜对待测物进行观察和鉴别。在临床应用中免疫荧光技术的作用方式主要有两种，一种是放射免疫分析法，另一种是时间分辨免疫荧光分析法。

2.免疫层析技术

免疫层析技术是免疫学上用于检测分析的一种色谱分析方法。其利用的是抗原-抗体特异性吸附的原理，该技术操作简单，能够在较短的时间内对待测物进行检测。目前在免疫层析技术中，使用比较好的有胶体金免疫层析技术。

3.酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定（ELISA）是把酶的高效催化作用与抗原抗体的特异性反应有机结合起来的一种新型的免疫检测技术，该方法既可以检测抗体，也可以检测抗原。其基本原理就是先用酶标记抗体，再进行抗原抗体反应，最后酶通过分解底物而显色，根据颜色的深浅来判断待检测的抗原和抗体的含量。ELISA主要有两大类：传统ELISA方法和新型ELISA方法。ELISA法具有操作简单、稳定性好、特异性高、可大批量检测样品等优点，因其检测成本较低，故比较适合现场检测。

4.电化学免疫传感器

电化学免疫传感器是免疫传感器中种类最多、研究最早、也比较成熟的一种检测技术。它是将电化学技术与免疫检测技术相结合，用电化学信号来反映待检测物质的浓度，从而对待分析物进行分析测定的一种检测方法，它由换能器（基本电极）和分子识别物质（抗原、抗体）组成。因为其有不同的检测方式，故将电化学免疫传感器分为以下几种类型：阻抗型、电容型、电位型、电流型。

5.免疫磁珠分离技术

免疫磁珠是一种既能结合活性蛋白（如抗原、抗体）又能被磁力所吸引的磁性微球，其表面包被了各种化学基团，以使得可以和别的物质发生结合。而免疫磁珠分离技术的基本原理就是将包被有抗体的磁珠与致病微生物（如抗原）结合，形成抗原抗体复合物，而包被有抗原的磁性微球就会因磁力的吸引而发生聚集，从而使得致病微生物与抗体形成的复合物与其他物质分开，以达到分离致病微生物的目的。

6.分子印迹技术

分子印迹技术（molecular imprinting，MI）是一种模拟抗原抗体反应合成特异性选择识别位点的实验技术，其在色谱填料、固相萃取、模拟酶催化、有机合成、手性药物拆分、免疫传感器等领域有着重要的应用前景。例如，基于分子印迹技术的载药角膜接触镜可以极大地延长药物缓释时间和提高给药效率。然而，分子印迹技术也有一些缺陷，如在极性溶剂或水溶液中该技术依旧不能很好地应用。故该技术目前主要用于小分子化合物的检测，对生物大分子尤其是蛋白质的研究以及在医学诊断、临床检验等领域的应用相对较少。